緩衝塩を選択するための開発原則

多くの液相法は、緩衝塩を使用する。 多くの人が液相法での緩衝塩の適用を理解していないことがわかっているので、私の見解のいくつかを共有し、議論を刺激したいと思います。

1.緩衝塩を塗る時間

サンプルまたはサンプルで研究される重要な不純物にイオン化傾向がある場合、他の特定のケースについては個別に説明します。 イオン化傾向が強い成分の中には、分子状態にあり、逆相クロマトグラフィー固定相とよりよく結合するものもあります。他のものはイオン状態にあり、移動相に対してより強い親和性を持っています。 緩衝塩を使用して分子状態とイオン状態のイオン化状態を制御しないと、ピークテイリングと分岐が容易になります。 この場合、水と有機系を移動相として使用しないでください。緩衝塩と有機系を選択する必要があります。

2.緩衝塩の緩衝能力とpH選択

を使用するとき緩衝電解質塩モバイルフェーズでは、一定のバッファリング能力が必要です。 サンプル注入の量を減らすことがピーク形状を改善することができるならば、それは緩衝塩溶液の緩衝能力が不十分であることを示し得る。 緩衝塩溶液の緩衝能力は、緩衝塩の濃度および緩衝塩溶液のpH値に関連する。 緩衝塩の濃度が高いほど、緩衝能力は強くなります。緩衝塩溶液のpH値がそのpKaに近いほど、緩衝能力は強くなります。 一般に、緩衝塩溶液のpH値はpKa ± 1の範囲内でなければなりません。メインの保持時間を確保するために 成分はpH値のわずかな変化のために大きく逸脱しない、緩衝塩溶液のpH値はサンプルpKa ± の範囲外でなければならない 2.

3.バッファ塩のカットオフ波长

各緩衝塩には対応するカットオフ波長があり、この方法の検出波長は緩衝塩溶液のカットオフ波長を下回ってはなりません。 検出波長が移動相のカットオフ波長に近いほど、ベースラインノイズが高くなり、応答値の誤差が大きくなり、コンポーネントの応答値と感度が小さくなります。

4.緩衝塩の応用のための一般的なアイデア

1.バッファー塩の濃度は一般に10-50 mmol/Lです。 緩衝塩の濃度は、必要な緩衝能力を満たすために、サンプルの特性と注入量に応じて選択する必要があります。

2.勾配溶出における有機相の最大許容割合は、緩衝塩と有機相の混合実験によって決定されるべきである。 10:90、20:80、30:70など、有機相の最大許容比率を決定するには、さまざまな緩衝塩-有機相の比率を取る必要があります。緩衝塩の沈殿が機器に損傷を与えるのを防ぐために、緩衝塩を機器に高い割合で設定しないでください。

3.カットオフ波長、pH値、バッファリング能力などの複数の制約に応じて緩衝塩を選択します。例えば、検出波長が最終吸収であれば、一般的にリン酸塩を選択すべきである。

4.コモンバッファー塩溶液には、0.1% リン酸/トリフルオロ酢酸/酢酸/ギ酸溶液、0.02-0が含まれます。05mol/Lリン酸二水素カリウム溶液 (リン酸でpH 3.0に調整) など。

5.アルカリ化合物の場合、カリウム塩が好ましく、尾鉱効果をよりよく抑制することができる。